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高效薄层色谱法(四)
【来源/作者】周世红 【更新日期】2018-08-04

四、点样

在薄层色谱技术中,点样是造成定量误差的主要来源。首先,样品溶液的制备过程(不同的提取方法和净化处理)即会导致薄层色谱不能重现以及定量的误差;同时,不同的点样设备、不同的点样体积、不同的点样方式等均会产生定量误差。传统的手工点样已不能满足样品定量2018白菜网址大全的需要,目前人们已采用仪器化的点样设备,与专用软件连用,大大提高了点样的精确性和自动化程度,使定量2018白菜网址大全结果更准确。

(一)样品溶液的制备

对样品中农药残留的分离测定时,首先要将样品中的残留农药定量地提取出来,配制成一定浓度的样品溶液。因为薄层吸附剂不必反复使用,且色谱过程同时也有净化作用,所以有的情况下样品溶液可以直接点样,不必进行前处理。如果样品中农药含量太低,或杂质太多,或其中的杂质使展开后的色谱背景太深以致影响分离及测定时,对样品溶液进行净化或点样前衍生化等过程是必要的。

配制样品溶液时应选用对组分溶解度较小的溶剂。溶剂的黏度不宜过高,以便于点样。

溶剂的沸点要适中,沸点过低则易于挥发而改变样品溶液浓度造成较大误差;沸点过高,样品溶液的溶剂会在原点残留,导致展开剂选择性的改变,特别是样品溶液的溶剂与展开剂的极性相差较大时更为明显。样品溶液配制时最常用的溶剂为甲醇及乙醇,有时也用丙酮。点样后必须将溶剂全部除去后再进行展开,但要避免高温加热,以免改变待测成分的性质。

(二)点样技术

在点样前,应将薄层板在日光及紫外光下检查板面有无损坏或污染,选择合格的薄层板后决定点样方式。点样方式、点样量及点样设备的选择决定于2018白菜网址大全的目的、样品溶液的浓度及被测农药的检出灵敏度。实际工作中,点状点样与带状点样使用较多,而点样体积和点样量一般不宜过大,否则容易造成原点“超载”,展开剂产生“绕行”现象使斑点拖尾或重叠,使扫描峰形不对称或不能基线分离,所得到的校正曲线会严重影响定量2018白菜网址大全结果,降低准确度。

1、点状点样:如果只是做定性2018白菜网址大全,用内径约0.5mm管口平整的毛细管或微量注射器将样品溶液点在距薄层底边约2 cm处,原点直径不超过5 mm,点间距为l~1.5cm即可。

2、带状点样:当进行定量2018白菜网址大全或样品溶液浓度低,点样体积大时,一般采用CAMAGLinomat 5半自动点样器(图5—48)进行带状点样。定量2018白菜网址大全的点样量范围为1~99μL。

利用内装的微处理器,只需在操作面板上输入相应的参数值,即可实现自动点样。使用时样品溶液吸在微量注射器中,点样器不接触薄层,而是用氮气将注射器中的溶液吹落到薄层上,薄层板在针头下定速移动点成5 mm×lmm的窄带(宽带可根据需要改变)。带状点样展开后的斑点不仅分辨率明显高于点状点样,而且精密准确,为定量2018白菜网址大全提供最佳条件。

3、自动点样:Automatic TLC Sampler 4型(ATS 4)全自动点样装置(图5—49)结合了现代先进电子及机械技术,能进行点状或带状点样,采用先进计算机编程控制,灵活多用,点样量为10nL~50μL,可随意设定点样规范,可应用于单向、双向、环形或向心色谱展开,高度自动化的点样使定量2018白菜网址大全结果准确。

五、流动相的选择与色谱展开

(一)流动相的选择

薄层色谱的流动相即其溶剂系统,又可称为展开剂或洗脱剂。薄层色谱条件是依据被分离物质的性质(如溶解度、酸碱性及极性)、吸附剂以及展开剂3种因素而定的。上述3种因素中被分离物质是固定的,吸附剂常用的种类也不多,而展开剂的种类则千变万化,不仅可以应用不同极性的单一溶剂作为展开剂,2018老虎机白菜大全的是应用二元、三元或多元的混合溶剂作为展开剂。薄层分离是被分离物质即样品、吸附剂及展开剂共同作用的结果,因此能找到与样品及吸附剂相匹配的展剂对分离就能起决定性的作用。

薄层色谱对流动相的要求包括:能使待测组分很好地溶解,不与组分发生化学反应;使展开后的组分斑点圆而集中,无拖尾现象;使待测组分的Rf最好在0.2~0.8范围,各组分的△Rf应大于0.05,以便完全分离;具有适中的沸点和小的黏度;价格低廉,毒性小。

参考资料:农药残留2018白菜网址大全

相关链接:

高效薄层色谱法(一)

高效薄层色谱法(二)

高效薄层色谱法(三)


【关键词】薄层色谱法,高效薄层色谱法,农药残留国家标准物质网 

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